Skip to content

Mysi model autosomalnej dominującej moczówki prostej neurohypophyseal ujawnia postępującą utratę neuronów produkujących wazopresynę ad 5

3 miesiące ago

381 words

Pobór wody, wydalanie moczu i osmolalność moczu zmutowanych myszy i kontrolnych ściółki WT kontrolnych mierzono w celu określenia, czy te mutacje powodowały zmieniony bilans wodny u myszy, podobny do skutków obserwowanych u ludzi. Nie zaobserwowano znaczących różnic między homozygotycznymi myszami A (3) T A / A (A 1) A, heterozygotycznymi myszami A / A (A 1) T / + i kontrolnymi w wieku 12 miesięcy (Figura 2). W przypadku mutacji C67X, 6-miesięczne myszy AvpC67X / + spożywały znacznie więcej wody w okresie 24 godzin niż kontrole WT Avp + / + (Figura 3a). Począwszy od miesiąca, heterozygotyczne myszy AvpC67X / + także wytwarzały więcej moczu w ciągu 24 godzin niż ich dopasowane do ściółki kontrolne Avp + / +; ta patologia stawała się coraz gorsza wraz z wiekiem (ryc. 3b). Dwumiesięczne myszy AvpC67X / + produkowały cztery razy więcej moczu niż kontrole, a w wieku 6 miesięcy różnica była prawie dziesięciokrotnie większa. Odwrotnie, osmolalność moczu była zmniejszona u 2-miesięcznych myszy AvpC67X / + i 6-miesięcznych myszy AvpC67X / + w porównaniu z kontrolami (Figura 3c). Tak więc, podobnie jak u ludzi z FNDI, myszy AvpC67X / + wytwarzają nadmierne ilości rozcieńczonego moczu, ale kompensują je zwiększając pobór wody. Figura 2Osubordynacja u myszy niosących mutację A (a1) T. Nie obserwowano znaczących różnic między 12-miesięcznymi myszami A (3) A / A (A 1) Ap, myszami A / A (A 1) T / + i ich odpowiednikami z miotu WT pod względem (a) poboru wody przez Okres 24-godzinny; (b) wydalanie moczu w ciągu 24 godzin; lub (c) osmolalność moczu (n = 4 dla wszystkich grup). Dane są średnie. SEM. mOsm, milliosmoles. Figura 3 Regulacja przepływności u myszy z mutacją C67X. (a) Przyjmowanie wody przez myszy w okresie 24 godzin. Sześciomiesięczne myszy AvpC67X / + pili znacznie więcej wody niż ich rodzeństwo z miotu WT. (b) Wydajność moczu myszy w okresie 24 godzin. Jedno-, 2- i 6-miesięczne myszy AvpC67X / + wydalały znacznie więcej moczu niż ich współmałżonkowie z WT. (c) Osmolalność moczu. Próbki moczu od myszy AvpC67X / + w wieku 2 i 6 miesięcy były bardziej rozcieńczone niż u ich myszy z miotu WT. n = 5 dla wszystkich grup. Dane są średnie. SEM. * P <0,05. Myszy AvpC67X / + wykazują zmniejszone stężenia AVP w surowicy. Stężenie AVP w surowicy mierzono w różnym wieku przy użyciu specyficznego testu ELISA w celu określenia, czy nieprawidłowości metaboliczne obserwowane u myszy AvpC67X / + mogą być spowodowane zmniejszeniem krążącego AVP. Trzy-, 6-, 9- i 12-miesięczne myszy AvpC67X / + miały niższe stężenia AVP w surowicy niż ich współmałżonkowie z WT (Figura 4a). Stężenie AVP w surowicy mierzono również u 1-miesięcznych myszy po 24-godzinnym okresie pozbawienia wody w celu zbadania zmian w wydzielaniu AVP w odpowiedzi na ten silny bodziec do wydzielania AVP. Po pozbawieniu wody stężenie AVP w surowicy u myszy AvpC67X / + stanowiło jedynie 20% poziomu u myszy Avp + / + (Figura 4b). Rysunek 4Asna analiza AVP. (a) Poziomy AVP w surowicy myszy AvpC67X / + i Avp + / + w pięciu różnych wiekach oznaczano ilościowo przy użyciu testu ELISA. W wieku 3, 6, 9 i 12 miesięcy surowica od myszy AvpC67X / + zawierała znacznie mniej immunoreaktywne AVP niż surowica od myszy WT (n = 4 dla wszystkich grup). (b) Immunaktywne stężenia AVP w surowicy od 1-miesięcznych myszy AvpC67X / + i WT po 24-godzinnym okresie pozbawienia wody. Wartości dla próbek AvpC67X / + były znacząco niższe niż dla próbek WT. Dane są średnie. SEM. * P <0,05. Immunohistochemiczne wykrywanie neuronów wazopresynowych w podwzgórzu. Przeprowadzono analizę immunohistochemiczną w celu określenia, czy nastąpiła utrata neuronów AVP u myszy AvpC67X / +. Podwzgórza 1-, 2-, 6- i 18-miesięcznych WT i zmutowanych myszy zostały wybarwione immunologicznie przeciwciałami poliklonalnymi przeciwko NPII i OT. Nie było istotnej różnicy między obiema grupami pod względem liczby neuronów oksytocynergicznych w PVN (Figura 5a, brązowe zabarwienie). Przeciwnie, myszy AvpC67X / + wykazywały mniej neuronów wazopresynowych niż myszy Avp + / + rozpoczynające się w wieku 2 miesięcy, z niemal całkowitą utratą neuronów wyrażających AVP o 18 miesięcy (Figura 5a, niebieskie zabarwienie). Neurony policzono i wyrażono jako stosunek wazopresynergii do neuronów oksytocynergicznych jako sposób normalizacji między sekcjami. Stosunek neuronów wazopresynergicznych do neuronów oksytocynergicznych u myszy AvpC67X / + był statystycznie niższy niż u myszy Avp + / + w wieku 2, 6 i 18 miesięcy (PVN, Figura 5b). Podobną progresywną utratę neuronów wazopresynowych obserwowano w jądrze nadoczodołowym (Figura 5b). Ryc. 5 Liczba neuronów wazopresynergicznych w PVN i jądrze nadprzewodnikowym (SON) podwzgórza zmniejsza się wraz z wiekiem u myszy AvpC67X / +. (a) Reprezentatywne odcinki podwzgórza z PVN 1-, 2-, 6- i 18-miesięcznych myszy AvpC67X / + (dolny rząd) i ich myszy z miotu WT (górny rząd) wybarwione immunologicznie dla NPII (niebieska, alkaliczna fosfataza) i OT (brązowy, DAB) są pokazane [podobne: choroba hashimoto a ciąża, techniki relaksacyjne dla dzieci, bmi kalkulator dla dzieci ] [więcej w: techniki relaksacyjne dla dzieci, zioła na odchudzanie ojca klimuszko, bmi kalkulator dla dzieci ]