Skip to content

Inhibitor IL-13 blokuje rozwój zwłóknienia wątroby podczas dominującej reakcji zapalnej typu T-helper typu 2 ad

1 miesiąc ago

748 words

Ostatnie badania in vivo z kilkoma chorobami zakaźnymi i modelami astmy sugerują, że IL-13 ma wiele ważnych czynności funkcjonalnych, które różnią się od IL-4. Kompleks receptora IL-13 składa się z co najmniej 3 różnych składników, w tym z receptora IL-4, łańcucha wiążącego o niskim powinowactwie, IL-13Ral i łańcucha IL-13R2 2 o wysokim powinowactwie (25, 32). . 34). Ostatnio wytworzono rozpuszczalne białko fuzyjne IL-13R2-Fc i zastosowano je z powodzeniem do neutralizacji IL-13 zarówno in vitro (25), jak i in vivo (28. 31). Ponieważ białko fuzyjne wiąże się z IL-13 z wysokim powinowactwem, ale nie neutralizuje IL-4, białko stanowi doskonałe narzędzie do analizy specyficznych ról IL-13. W niniejszym badaniu wykorzystano antagonistę IL-13 u myszy z dzikim typem (WT) i z niedoborem IL-4 (3 w celu przeanalizowania udziału IL-13 i IL-4 w patogenezie schistosomatozy. W tych badaniach szczegółowo zbadano tworzenie się ziarniniaków wątroby, koncentrując się na rekrutacji eozynofilów i komórek tucznych, a rozwój zwłóknienia indukowanego przez jaja oceniano ilościowo za pomocą technik biochemicznych, histologicznych i molekularnych. Podczas gdy wyniki tego badania pokazują, że IL-13 i IL-4 wykazują pewne nadmiarowe aktywności w patogenezie schistosomatozy, wyraźne wyjaśniono również różne funkcje obu cytokin. Najważniejszym i nowym odkryciem była obserwacja, że IL-13, a nie IL-4, była główną cytokiną typu Th2 kierującego typem I i mRNA kolagenu typu III oraz zwłóknieniem wątroby u zakażonych myszy. Tak więc, nasze odkrycia dostarczają dowodów, że inhibitor IL-13, taki jak sIL-13R2-Fc, może być korzystny leczniczo w zapobieganiu zwłóknieniu związanemu z przewlekłą chorobą zakaźną. Metody Zwierzęta, pasożyty i preparaty antygenowe. Sześcio- do 8-tygodniowe samice myszy C57BL / 6 i myszy z niedoborem IL-4 ((tło C57BL / 6, 10. krzyżowanie wsteczne) otrzymano od Taconic Farms Inc. (Germantown, New York, USA) i zakażono przezskórną prowokację . Cerkarie portorykańskiego szczepu S. mansoni (Naval Medical Research Institute, Bethesda, Maryland, USA) uzyskano z zainfekowanych ślimaków Biomphalaria glabrata (Biomedical Research Instruments, Rockville, Maryland, USA). Rozpuszczalny antygen jaja (SEA) oczyszczono z homogenizowanych jaj, jak opisano wcześniej (9). Rozpuszczalne białko fuzyjne receptora IL-13 a2-Fc (sIL-13R2 2-Fc) i ludzka IgG (kontrola-Fc) przygotowano jak opisano wcześniej (25) (dostarczone przez Genetics Institute Inc., Cambridge, Massachusetts, USA ). Zwierzęta traktowano wstrzyknięciem dootrzewnowym w 0,5 ml PBS (200 .g / mysz na dzień) co drugi dzień, po rozpoczęciu wytwarzania jaj. Jak opisano wcześniej, kontrola Fc nie miała wykrywalnego wpływu na patologię lub ekspresję cytokin u zakażonych myszy (29). Nie zaobserwowano żadnej śmiertelności wśród żadnej grupy myszy i nie było żadnych objawów kacheksji do 8 tygodni po zakażeniu. Histopatologia i pomiar włóknienia. Wielkość ziarniniaków wątrobowych określono na skrawkach histologicznych wybarwionych barwnikiem Wrighta Giemsy (Histopath of America, Clinton, Maryland, USA). Procent eozynofilów, komórek tucznych i innych typów komórek oceniano w tych samych sekcjach. Martwicę miąższu oceniano w skali 0. 4, przy czym 0 oznacza najmniej rozległą martwicę, a 4 to najbardziej rozległa martwica. Częstotliwość komórek tucznych została również przypisana w podobnej skali, przy użyciu zakresu 0. 4. Liczbę jaj schistosomu w wątrobie i jelicie oraz zawartość kolagenu w wątrobie, oznaczoną jako hydroksyprolinę, zmierzono jak opisano wcześniej (9). Specyficznie, kolagen wątrobowy mierzono jako hydroksyprolinę techniką Bergmana i Loxleya po hydrolizie 200 mg części wątroby w 5 ml 6 N HCl w temperaturze 110 ° C przez 18 godzin (35). Wzrost hydroksyproliny w wątrobie był dodatnio związany z liczbą komórek jajowych we wszystkich doświadczeniach (dane nie pokazane), a kolagen wątrobowy jest zgłaszany jako wzrost powyżej prawidłowego kolagenu w wątrobie w mikromolach na 10 000 jaj: (zakażony kolagen wątrobiany – normalny kolagen wątrobowy) / komórki jajowe wątroby × 10. 4. Zwłóknienie zostało również ocenione histologicznie na skrawkach wybarwionych czerwienią Picrosirius. Wszystkie ziarniniaki w każdej sekcji oceniono na podstawie gęstości czerwonego pikrozirium w skali 1. 4, a drugi pomiar zajmowanego obszaru również określono w tej samej skali. Całkowity wynik zwłóknienia określono przez pomnożenie gęstości i powierzchni dla każdego ziarniaka (wynik 16 byłby maksymalny). Średnio 30 ziarniaków na mysz zostało uwzględnionych we wszystkich analizach. Aby kontrolować konsystencję, ta sama osoba uzyskała wszystkie cechy histologiczne i nie miała wiedzy na temat projektu eksperymentalnego. Izolacja i oczyszczanie RNA i RT-PCR
[podobne: laserowe usuwanie zylakow, olejek arganowy gdzie kupić, piłka do siedzenia przy biurku ]
[hasła pokrewne: piłka do siedzenia przy biurku, olej kokosowy na włosy jak stosować, olejek arganowy gdzie kupić ]