Skip to content

Inhibitor IL-13 blokuje rozwój zwłóknienia wątroby podczas dominującej reakcji zapalnej typu T-helper typu 2 ad 5

4 tygodnie ago

683 words

Supernatanty hodowli analizowano za pomocą ELISA pod kątem IL-4, IL-13, IL-5, IL-10 i IFN-y. Jak można było przewidzieć, krezka i hodowle śledziony przygotowane z myszy WT wykazywały wysoce spolaryzowaną odpowiedź cytokin typu Th2. Wytworzyli wysokie poziomy IL-4, IL-5, IL-10 i IL-13 w odpowiedzi na stymulację SEA i niewiele lub brak IFN-y. Myszy z niedoborem IL-4 (3 wykazują bardziej mieszany profil typu Th1 / Th2. Rzeczywiście, znaczący IFN-y specyficzny dla SEA odpowiedź wykrywano u myszy z niedoborem IL-4., co jest zgodne z wcześniejszymi badaniami (17,18). IL-13, IL-10 i, w mniejszym stopniu, IL-5 wykryto również u tych zwierząt, chociaż poziomy tych cytokin były znacznie zmniejszone w porównaniu z myszami WT. Utrzymanie niskiej, ale znaczącej niezależnej od IL-4 (3 odpowiedzi IL-13 prawdopodobnie wyjaśnia znaczącą ziarniniakową odpowiedź, która jest utrzymywana w nieobecności IL-4 (Figura 1). Co istotne, pomimo znacznego hamującego wpływu na zwłóknienie wątroby, sIL-13R2 2-Fc nie wywiera znaczącego wpływu na odpowiedzi cytokin typu Th1 lub Th2 u myszy z niedoborem WT i IL-4 (3. Należy również zauważyć, że we wszystkich przypadkach wytwarzanie cytokin było silnie zależne od odpowiedzi komórek T CD4 +, ponieważ wykryto niewielką ekspresję cytokiny lub brak tej ekspresji w żadnej z stymulowanych przez anty-CD4 stymulowanych przez SEA kulturach. Figura 2 Na profil cytokin typu Th1 / Th2 nie wpływa leczenie sIL-13R2-Fc. Zakażone myszy C57BL / 6 WT i IL-4 (3 (4KO) traktowano kontrolną Fc lub sIL-13R2 2-Fc, jak opisano w Metodach MLN izolowano od poszczególnych myszy i przygotowywano zawiesiny pojedynczych komórek (3). X 106 komórek na studzienkę w 24-studzienkowych płytkach) i stymulowano pożywką (kwadraty), SEA przy 20 (ag / ml (kółka) lub SEA i 50 (ag / ml mAb anty-CD4 (trójkąty). Wszystkie cytokiny badano w supernatantach hodowli w teście ELISA 72 godziny po stymulacji, jak opisano w Methods. Symbole reprezentują wartości dla poszczególnych myszy, a słupki wskazują środki w każdej grupie. Th1 / Th2 – ekspresja mRNA cytokin w ziarniniakowatych wątrobach z niedoborem IL-4 (3 i myszami traktowanymi sIL-13R22-Fc2. Aby określić, czy podobny wzór ekspresji cytokin obserwowano in vivo w miejscu tworzenia ziarniaków, wyizolowaliśmy wątrobowy mRNA z różnych grup myszy w 8 tygodniu po zakażeniu i przeprowadziliśmy ilościową RT-PCR. Zakażone myszy WT wykazywały silny profil mRNA cytokiny typu Th2, wykazując znaczny wzrost mRNA dla IL-4, IL-13, IL-5 i IL-10 (Figura 3). Myszy WT wykazywały także nieznaczny wzrost ekspresji IFN-y. mRNA, co było zgodne z poprzednimi obserwacjami (13). W przeciwieństwie do tych wyników, poziomy mRNA dla IL-13 i IL-5 były znacznie niższe u myszy z niedoborem IL-4 (3, podczas gdy IL-10 i TNF-a. wzrost mRNA i IFN-y ekspresja mRNA nie zmieniła się znacząco. Ponownie, podobnie do wyników in vitro uzyskanych z hodowli MLN i splenocytów, blokada IL-13 nie miała znaczącego wpływu na ekspresję mRNA cytokin u myszy z niedoborem WT i IL-4 (3. Występował jednak niewielki wzrost poziomów mRNA dla IL-10 u myszy z niedoborem IL-4 (3 leczonych sIL-13R2 2-Fc, chociaż jest mało prawdopodobne, aby tłumaczył on zmniejszenie zwłóknienia, ponieważ wysoce rozbieżne poziomy IL-4. 10 wykryto u myszy WT traktowanych sIL-13R2 2-Fc, w porównaniu z myszami z niedoborem IL-4 (3, ale zaobserwowano podobny spadek zwłóknienia. Ekspresję mRNA TGF-ai i TGF-a2 badano również w tkankach ziarniniakowatych; jednak nie zaobserwowano znaczących różnic u zarażonych myszy z niedoborem IL-4 (3 lub u zwierząt leczonych sIL-13R2 2-Fc (dane nie przedstawione). Figura 3. Ekspresja mRNA cytokin typu 3Th2 jest zmniejszona w wątrobach zainfekowanych myszy z niedoborem IL-4 (3, ale nie ma na nią wpływu blokada IL-13. Zainfekowane i leczone myszy C57BL / 6 WT i IL-4 (3 (4KO) uśmiercono w 8 tygodniu po zakażeniu, a próbki wątroby przygotowano do RT-PCR. Przedstawione dane są indywidualnymi wartościami 9. 10 zwierząt na grupę, a słupki wskazują średnią w każdej grupie. Średnie wartości od 5 niezainfekowanych WT (wypełnione kółka) i 5 niezakażonych myszy z niedoborem IL-4 ((puste kółka) są pokazane na osi Y dla każdej cytokiny. Wszystkie dane zostały powtórzone w drugim badaniu. * Dane znacznie różnią się od grupy kontrolnej WT-Fc, określonej przez ANOVA (P <0,05). Poziomy mRNA prokolagenu I i prokolagenu III są zmniejszone w wątrobach myszy leczonych sIL-13R2-2cc, ale nie mają wpływu na niedobór IL-4. Opisane powyżej badania cytokin cytokin in vitro i in vitro sugerują, że efekt antyfibrotyczny sIL-13R2 2-Fc prawdopodobnie nie zostanie wyjaśniony zmianami w ekspresji cytokin typu Th1 lub Th2 [przypisy: piłka do siedzenia przy biurku, novision, rentierstwo ] [hasła pokrewne: sukces definicja, marek kamiński blog, poradnia osteoporozy warszawa ]