Skip to content

Ekspresja funkcjonalnych receptorów chemokiny CXCR4 na ludzkich komórkach nabłonka okrężnicy ad 6

1 tydzień ago

758 words

Wrzodziejące zapalenie okrężnicy z ekspresją CXCR4 w komórkach nabłonka okrężnicy krypty i komórkach infiltrujących blaszkę właściwą (x 25). (d) Nie wykryto barwienia w komórkach nabłonka okrężnicy przy użyciu przeciwciała dopasowanego do izotypu (x 25). (e) Ekspresja CXCR4 w komórkach nabłonkowych w końcowym odcinku jelita krętego (× 25). Dyskusja Komórki nabłonkowe pokrywają powierzchnię błony śluzowej okrężnicy i tworzą mechaniczną barierę, która oddziela gospodarza od środowiska zewnętrznego. Oprócz dostarczania powierzchni do absorpcji, komórki nabłonkowe wydzielają i reagują na wiele mediatorów stanu zapalnego, umożliwiając w ten sposób komunikację z komórkami układu immunologicznego i zapewniając, że odpowiedzi zapalne są montowane przeciwko przyjmowanym patogenom. W poprzednich badaniach wykazaliśmy, że komórki nabłonka okrężnicy są wystawione na prozapalne cytokiny IL-1 i TNF-a. może wydzielać chemokiny, takie jak IL-8, MCP-1 i RANTES (23). Tutaj wykazaliśmy, że mRNA dla wielu chemokin z rodzin CC i CXC ulega ekspresji w nieopalonej ludzkiej okrężnicy. Niektóre z tych chemokin mogą być odpowiedzialne za rekrutację wyspecjalizowanego podzbioru (głównie CD3 + i CD8 +) śródnabłonkowych komórek T, które mogą stanowić do 15% normalnego, nieprzepalonego ludzkiego nabłonka okrężnicy (26). Te komórki T, wraz z komórkami nabłonka okrężnicy, są pierwszymi kontaktującymi się z antygenami jelitowymi i uważa się, że odgrywają rolę w nadzorze immunologicznym. Zwiększoną produkcję chemokin odnotowano również w błonie śluzowej jelita grubego od pacjentów z chorobą zapalną jelit (27), co może być związane ze zwiększonym napływem śródnabłonkowych limfocytów jelitowych (28). Co ciekawe, nie wykryliśmy mRNA IL-8 w prawidłowej okrężnicy, chociaż może on być wytwarzany przez stymulowane cytokiną komórki nabłonka. Jego rolą jest prawdopodobnie rekrutacja neutrofilów, która występuje podczas ostrego zapalenia. Chemokiny wytwarzane z aktywowanych leukocytów, fibroblastów lub komórek nabłonkowych prawdopodobnie odgrywają rolę w rekrutacji leukocytów do nadzoru lub zapalenia w jelicie. W niniejszym badaniu zbadaliśmy, czy komórki nabłonka okrężnicy są celem regulacji autokrynnej lub parakrynnej przez szeroki wachlarz chemokin produkowanych przez komórki błony śluzowej okrężnicy. Nasze wyniki pokazały, że nabłonkowa linia komórkowa HT-29 eksprymuje mRNA tylko jednego ze znanych receptorów chemokin CXCR4. Receptor ten był wyrażany jako białko na powierzchni komórki około 50% komórek HT-29 i był funkcjonalny, jak wykazano przez strumień Ca2 + indukowany przez jego ligand, SDF-1 .. Inne chemokiny z rodzin CXC i CC nie wywołały żadnej zmiany w przepływie Ca2 + w komórkach HT-29 zgodnych z brakiem mRNA dla ich receptorów. Te komórki nabłonka okrężnicy eksprymują mniej receptorów chemokin niż komórki śródbłonka, które eksprymują mRNA dla CXCR1-4 (16). MRNA CXCR4 był jednak obficie eksprymowany w niestymulowanych komórkach HT-29, jak pokazano na podstawie zdolności do wykrywania transkryptów mRNA za pomocą analizy Northern; Wykazano także, że mRNA CXCR4 jest najbardziej obfitym receptorem chemokin wyrażanym w śródbłonku naczyniowym (25). Wykazaliśmy również, że CXCR4 występuje nie tylko na linii komórkowej HT-29, ale jest również obecny w komórkach nabłonkowych normalnej i zapalnej okrężnicy i jelita cienkiego. Dalsze dowody, że CXCR4 był funkcjonalny, uzyskano przez pomiar zwiększonej ekspresji międzykomórkowej cząsteczki adhezyjnej, ICAM-1, w komórkach HT-29 w odpowiedzi na stymulację SDF-1 .. Wcześniej wykazano, że chemokina CC, MCP-1, indukuje mRNA ICAM-1 w komórkach mięśni gładkich po 2 godzinach (12). W komórkach HT-29 prozapalne cytokiny, IL-1 i TNF-a, indukują ekspresję mRNA ICAM-1 o 2 godziny (dane nie przedstawione), a zatem efekt SDF-1. na komórkach HT-29 (gdzie ekspresja ICAM-1 osiąga maksimum w 24 godziny) jest opóźniona. Sugeruje to, że może działać poprzez mechanizm pośredni, prawdopodobnie obejmujący wytwarzanie nieznanego związku pośredniego. Alternatywnie, możliwe jest, że ponieważ SDF-1. jest zwykle prezentowany komórkom przez zewnątrzkomórkowe białka macierzy, może być w pełni aktywny w tej konformacji, dlatego wydłużony czas wymagany do indukcji ICAM-1 może być spowodowany tym, że użyliśmy rozpuszczalnego SDF-1 .. Chociaż dobry wskaźnik, że CXCR4 jest funkcjonalny, niekoniecznie wynika to z SDF-1. podwyższa ekspresję ICAM-1 w nabłonku okrężnicy in vivo, chociaż może to być mechanizm zaangażowany w rekrutację leukocytów w stanach zapalnych jelit, ponieważ SDF-1. może wywołać zatrzymanie toczących się limfocytów w kierunku ICAM-1 (29). SDF-1. a jego receptor CXCR4 jest różny w wielu aspektach od innych par ligandów chemokin-receptor. CXCR4 jest jednym z nielicznych receptorów chemokin, dla których do tej pory zidentyfikowano tylko jeden ligand
[przypisy: zapalenie migdałków leczenie, brian tracy opinie, zioła na odchudzanie ojca klimuszko ]
[przypisy: laserowe usuwanie zylakow, ośrodki leczenia uzależnień nfz, piłka do siedzenia przy biurku ]